ПГТ-М

Пациенты предоставляют врачу-генетику информацию о найденных у них патогенных генетических вариантах. Наличие указанных вариантов должно быть подтверждено документально отчетом генетической лаборатории. Врач-генетик оценивает риски рождения детей с наследственной патологией, определяет целесообразность проведения ПГТ-М и определяет круг родственников пациентов, чей биологический материал потребуется для разработки тест-системы. Затем собирают весь необходимый биоматериал и передают его в лабораторию.

Сотрудники генетической лаборатории проводят разработку прямого и косвенного тестов на патогенные варианты будущих родителей.
Прямой тест предполагает качественное (а иногда и количественное) определение патогенного варианта в пробе напрямую. В зависимости от структуры патогенного варианта в качестве метода анализа может быть выбрана полимеразная цепная реакция в реальном времени, секвенирование по Сангеру, множественная амплификация лигированных зондов, либо полиморфизм длин рестрицированных фрагментов.
Косвенный тест предполагает определение наличия генетических маркеров, находящихся в непосредственной близости от патогенного варианта на одной хромосоме. Для этого используются STR (Short Tandem Repeats) - короткие повторяющиеся последовательности некодирующей ДНК, распределенные по всему геному. Они отличаются высокой полиморфностью и различаются по размеру от человека к человеку. Системы STR подбираются таким образом, чтобы исследователь мог различить аллели (варианты последовательности), которые эмбрион получает от отца и от матери.
По завершению этапа генетическая лаборатория составляет отчет, в котором приводит данные о достоверности разработанных тест-систем. В случае, если данные удовлетворяют пациентов и лечащего врача-генетика, переходят к следующему этапу.

Пациентам проводят цикл ВРТ. Полученные эмбрионы растят до 5-7 суток развития, после чего проводят биопсию 5-8 клеток трофэктодермы каждого жизнеспособного эмбриона. Процедура сопровождается забором эмбриологического контроля, также может осуществляться сбор использованной культуральной среды.

Сотрудники генетической лаборатории выделяют ДНК из клеток, затем проводят полногеномную амплификацию (многократное увеличение геномной ДНК в образце) и осуществляют преимплантационное генетическое тестирование на моногенное заболевание с использованием тест-систем, разработанным на этапе 2. По исследованным эмбрионам предоставляют краткий лабораторный отчет, по которому врач-генетик составляет медико-генетическое заключение о возможности переноса.

Пациентке проводят перенос эмбриона, рекомендованного врачом-генетиком по результатам ПГТ-М.