ПГТ-А NGS в RLAB NGC

ПГТ-А NGS

>20 тысяч обследованных эмбрионов
70% циклов с ПГТ-А

Преимплантационное генетическое тестирование на хромосомные аномалии (ПГТ-А) – это эффективный способ выявления отклонений в хромосомном наборе у эмбрионох  перед  их переносом в полость матки.

В норме у человека весь генетический материал упакован в 23 пары хромосом (всего 46 хромосом в каждой клетке организма). Эмбрионы с нормальным числом хромосом  называются  эуплоидными. Эмбрионы, в которых присутствуют лишние хромосомы, либо отсутствуют некоторые из них, называются анеуплоидными.  Анеуплоидия оказывает на эмбрионы комплексный негативный эффект и является одной из основных причин (до 80%)  неудачных попыток ЭКО, прерывания беременности и возникновения пороков развития плода. Чаще всего анеуплоидия возникает из-за ошибок при образовании женских половых клеток. Вероятность возникновения таких ошибок повышается с возрастом: у женщин старше 35 лет может превышать 50%, а уже у женщин в возрасте 40 лет – 75%.

Согласно  данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) у женщины в возрасте 30 лет риск родить ребенка с трисомией (одной из возможных хромосомных аномалий) составляет 1/385, в возрасте 40 лет - 1/63 и 1/19 в возрасте 45 лет.

Прогноз развития эмбриона
наступления беременности
Пренатальный прогноз
Постнатальный прогноз
Рекомендации
по обследованию плода до и после рождения.
  • Прогноз развития эмбриона
    наступления беременности
  • Пренатальный прогноз
  • Постнатальный прогноз
  • Рекомендации
    по обследованию плода до и после рождения.
Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ-А) NGS

График зависимости возникновения анеуплоидии
в эмбрионах от возраста матери

hghhmgmn

Подробности
ПГТ-А

В большинстве случаев имплантации анеуплоидных эмбрионов не происходит, либо такая беременность заканчивается спонтанным абортом. Однако, анеуплоэдия затрагивающая хромосомы маленького размера, или половые хромосомы может привести к рождению ребенка с различными аномалиями развития (0.3-0.5% от всех живорождений). Примером наиболее распространенных нарушений такого рода являются синдром Патау (дополнительная 13-ая хромосома), синдром Эдвардса (дополнительная 19-ая хромосома) и синдром Дауна (дополнительная 21-ая хромосома). Ошибки, возникающие после оплодотворения, при делении клеток эмбриона, приводят к возникновению мозаичных нарушений. При этом нормальный набор хромосом несет лишь часть клеток эмбриона. Данное явление встречается значительно реже, чем ануплоидия и требует консультации врача-генетика. Результат переноса подобных эмбрионов зависит от множества факторов, включая долю аномальных клеток, вида мозаичной патологии и затронутой мозаицизмом хромосомы.

Результаты ПГТ-А 20000 эмбрионов

1.
Эуплоидные эмбрионы
42%
2.
Сегментарные нарушения у эмбрионов
3%
3.
Анеуплоидные эмбрионы
36,5%
4.
Мозаичные эмбрионы (мозаицизм/эуплоидия)
13%
5.
Множественные хромосомные нарушения у эмбрионов
3,5%
6.
Без ответа
2%

Согласно исследованиям ESHRE PGD Consortium, экспертов в области преимплантационного генетического тестирования, основными показаниями для проведения PGT-A являются:

  • Возраст женщины – старше 35 лет
  • Привычное невынашивание беременности
  • Повторные неудачные попытки ЭКО при переносе эмбрионов хорошего/отличного качества
  • Мужской фактор бесплодия, сопряженный с тяжелыми нарушениями сперматогенеза
  • Носительство хромосомных аномалий, как численных, так и структурных
  • Сцепленные с полом заболевания, передающиеся по наследству

КАКИЕ ЗАДАЧИ РЕШАЕТ ПГТ-А?

  • 1. Уменьшение числа «безрезультативных переносов
    2. Cнижение количества спонтанных прерываний беременности
    3. Увеличение шансов на беременность у пациентов из группы риска (поздний возраст, неудачные многократные попытки ЭКО)
    4. Снижение риска многоплодной беременности, благодаря переносу одного обследованного эмбриона
    5. Предоставление пациенту важной диагностической информации, на основе которой может быть принято
    решение о проведении следующего цикла ЭКО
  • Снижение риска хромосомной патологии ребенка

Проведение
исследования

Биопсия трофэктодермы у эмбрионов на стадии бластоцисты 5/6 дня культивирования

Получение 3-5 клеток трофэктодермы. Данная манипуляция позволяет получить достаточно количество материала для анализа с минимальным влиянием на жизнеспособность эмбриона.

Полногеномная амплификация (WGA)

Полногеномная амплификация (WGA). Выделение ДНК из полученных клеток и увеличение ее количества методом ПЦР для последующего анализа.

Проведение секвенирования методом NGS

Продукт WGA используется для приготовления коротких, специальным образом подготовленных фрагментов ДНК. Последующий анализ позволяет получить представление о числе хромосом в анализируемых клетках эмбриона.

КАКОЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ?

На данный момент существует несколько технологий проведения ПГТ-А. Наиболее распространенными и информативными (анализируют все 46 хромосом) из них являются сравнительная геномная гибридизация на микрочипах (array CGH) и высокопроизводительное секвенирование (секвенирование нового поколения, NGS). В лаборатории “Эн Джи Си Ресёрч лаб” ПГТ-А проводится методом высокопроизводительного секвенирования NGS. Метод позволяет получить более детальную информацию как о численных аномалиях хромосом (включая мозаицизм на уровне 20%), так и о структурных пере стройках (включая сегментарные анеуплоидии) всех 46 хромосом.

Преимплантационное генетическое тестирование методом NGS в клинике NGC (2): с декабря 2016 N=17000

Преимплантационное генетическое тестирование методом NGS в клинике NGC

Техническая
база

На сегодняшний момент в нашей лаборатории приборная база состоит из двух моделей секвенаторов фирмы-производиля Illumina, Inc: MiSeq и MiSeqDX. Обе модели имеют одинаковый функционал и выполняют одни и те же задачи, разница заключается лишь в том, что модель DX имеет регистрационное удостоверение для использования в диагностических целях в США и ЕС. Максимальная загрузка обоих приборов за один запуск – 48 образцов. Общее время работы прибора от момента загрузки готового пула библиотек до импортирования сгенерированных данных с помощью специального программного обеспечения BluFuse составляет около 5ти часов.

Рабочий процесс
Miseq

  • Подготовка библиотеки

    Добавление адаптеров для секвенирования и подготовка библиотек к секвенированию

  • Секвенирование

    Перенос библиотек в проточную кювету и секвенирование

  • Анализ данных

    Обработка данных/добавление комментариев, составление отчета в приборе

  • Окончательные результаты

    Интерпретация и составление отчета о биологическом контексте

Результат PGT-A
  • Протокол лабораторного тестирования и медико-генетическое заключение
  • Результат исследования (соответствие нормальному хромосомному статусу/отклонения в числе и/или структуре хромосом
  • Пренатальный и постнатальный прогноз
  • Рекомендации по переносу

Медико-генетическое заключение

по результатам тестирования эмбриона

Протокол № XXX

преимплатационного генетического тестирования (ПГТ-А)

Наша команда

Вяткина Светлана Вячеславовна

Заведующая лабораторией генетики

СТРИЖОВА МАРИЯ АЛЕКСЕЕВНА

Медицинский лабораторный физик

ОБЕРНИХИНА ЕКАТЕРИНА АЛЕКСАНДРОВНА

Врач лабораторный генетик

Волкоморов Виктор Владимирович

Биоинформатик
Связаться с нами

© NGC Research Lab
ООО "Василеостровская Клиника Репродукции"
Информация на сайте не является публичной офертой

Разработка сайта IT агентство Муравей.